Мультистероидный профиль: Мультистероидный анализ крови: определение жизненно необходимых гормонов человека на качественно новом уровне

On 26.10.197806.10.2021

Содержание

Мультистероидный анализ крови: определение жизненно необходимых гормонов человека на качественно новом уровне

Термином «мультистероидный анализ» называют определение профиля стероидных гормонов методом хромато-масс-спектрометрии. Совокупность результатов этого анализа обозначают термином «стероидный профиль». В сущности, это два равнозначных термина, обозначающих одно и то же.

Мультистероидный анализ — это отечественная разработка, методика анализа валидирована и аттестована как «Методика (метод) измерений массовой концентрации стероидных гормонов в пробах крови методом жидкостной хроматографии — тандемной масс-спектрометрии. МУ 08–47/376», зарегистрирована в реестре РОССТАНДАРТА под номером ФР.1.31.2015.21875.

В настоящее время мультистероидный анализ не входит в список тестов, утвержденных Министерством здравоохранения РФ, и осуществляется в рамках проведения научного исследования. Пациенты сами вынуждены оплачивать стоимость проведения данного анализа. Ведётся работа над тем, чтобы в будущем эти расходы покрывались за счет страховой медицины.

Количественное определение основных стероидных гормонов и их метаболитов в сыворотке крови или в слюнной жидкости референсным методом — тандемной хромато-масс-спектрометрией (в научной литературе этот метод также обозначается как LC-MS/MS) – трудоёмкая и дорогостоящая процедура. Ключевой особенностью метода является возможность определения всех заявленных аналитов в ходе одного анализа (рис. 1), поэтому в пересчете на один аналит стоимость определения получается едва ли не меньше, чем альтернативными иммунохимическими методами.

Рис 1. Аналиты, определяемые в ходе одного анализа, согласно методике

Почему в названии методики присутствует обозначение биоматериала «кровь»?

Для того, чтобы сразу обозначить отличие его от широко известного анализа «стероидный профиль мочи». Следует отметить, что информативность анализа мочи совсем другая и требует иной трактовки, поскольку в моче содержатся в основном неактивные формы стероидов: сульфаты, глюкурониды и гидроксилированные производные, уже ненужные организму, и выведенные из него. В крови же определяют концентрации активных форм стероидных гормонов, которые циркулируют в системе общего кровоснабжения, поступают в клетки и оказывают сигнальное воздействие на геном.

При каких медицинских состояниях показано определение стероидного профиля крови, каким врачам стероидный профиль крови поможет с постановкой диагноза?

1. Всевозможные формы врожденной дисфункции коры надпочечников (ВДКН). ВДКН является врожденным заболеванием, проявляющемся в нарушении биосинтеза стероидов. Вызывается нарушением функционирования одного из 5 ферментов коры надпочечников. Это может быть дефицит 21a-гидроксилазы (CYP21) или 11b-гидроксилазы (CYP11B1). Традиционный скрининг новорожденных на ВДКН методами иммуноанализа зачастую дает ложноположительные результаты при определении 17-гидроксипрогестерона. Поэтому во всех спорных случаях необходима подтверждающая диагностика методом LC-MS/MS [1]. Диагностика неклассической формы ВДКН (НФ ВДКН) иммунохимическими методами представляет значительную трудность, поэтому НФ ВДКН зачастую не диагностируется при неонатальном скрининге, но даёт о себе знать в последствии: у подростков появляется преждевременное оволосение, угревая сыпь; у девочек – гирсутизм, менструальная дисфункция, репродуктивные нарушения. Для стероидного профиля при НФ ВДКН характерно повышение 21-дезоксикортизола и 17-ОН-прогестерона, поэтому мультистероидный анализ в комплексе с генетическим тестированием чрезвычайно полезны для диагностики этого заболевания.

2. Надпочечниковая недостаточность. Для этого проводится стимуляционный тест с АКТГ и измеряются уровни кортизола, альдостерона, и 11-дезоксикортизола: базальные, через 30 и 60 минут после стимуляции. При первичной надпочечниковой недостаточности альдостерон не реагирует на стимуляцию, в то время как при вторичной недостаточности регистрируется повышение его уровня. В контрольной группе уровень 11-дезоксикортизола повышается в 15-20 раз в ответ на стимуляцию АКТГ, а кортизола – примерно в 3 раза [2].

3. Гипогонадизм у мужчин. Для правильной диагностики гипогонадизма у мужчин требуется определение точного уровня общего тестостерона (ТТ) с использованием масс-спектрометрии. В исследовании на 10000 добровольцах было установлено, что диагноз гипогонадизма можно поставить, если концентрация ТТ ниже 12.1 нмоль/л по данным масс-спектрометрии [3].

4. Контроль заместительной терапии у мужчин и женщин (HRT). Для данной категории пациентов масс-спектрометрия является «золотым стандартом», так как позволяет подобрать правильную терапевтическую дозу гормона (или стимулятора), детально проследить за реакцией всех метаболитов на заместительную терапию и избежать интерференции, присущей иммунохимическим методам [4-6].

5. Очень важно отслеживать уровни стероидных гормонов в ходе беременности и в течение одного года после родов. Мультистероидный анализ даёт гораздо более точную информацию об андрогенном статусе по сравнению с традиционным ДГЭА-сульфатом.

6. Гинекология. «Вирилизирующие» (андрогенпродуцирующие) опухоли надпочечников обладают андрогенпродуцирующей активностью и обусловливают развитие вирильного синдрома у женщин. Установлено, что практически любая гормонально активная опухоль яичников может быть источником избыточной продукции андрогенов и/или эстрогенов и должна быть диагностирована с использованием метода тандемной масс-спектрометрии [7].

7. Диабет. Данное заболевание затрагивает на нервную систему и оказывает влияние на концентрацию нейростероидов. LC-MS/MS дает возможность определять концентрации нейроактивных стероидов с целью разработки новых подходов в лечении диабетической нефропатии [8].

8. Спортивная медицина. Стероидный профиль у спортсменов в крови и в слюне может дать важную информацию о состоянии их здоровья, спортивной форме, контролировать ход тренировок за счет оптимального распределения нагрузок.

Мультистероидный анализ с трудом пробивает для себя место в жизни с учетом широкого распространения методов иммуноанализа и сопротивления со стороны приверженцев традиционных технологий. Но за этим методом будущее, это уже признано лучшими представителями медицинской науки [9].

Литература.

Rauh M. Steroid measurement with LC-MS/MS in pediatric endocrinology. Molecular and cellular endocrinology, 2009, 301, 272-281.
Stolze BR, Gounden V, Gu J, Elliott EA, Masika LS, Abel BS, Merke DP, Skarulis MC, Soldin SJ. An improved micro-method for the measurement of steroid profiles by APPI-LC-MS/MS and its use in assessing diurnal effects on steroid concentrations and optimizing the diagnosis and treatment of adrenal insufficiency and CAH. J Steroid Biochem Mol Biol. 2015 Dec 22. pii: S0960-0760(15)30165-5. doi: 10.1016/j.jsbmb.2015.12.024

Bhasin S, Pencina M, Jasuja GK, et al. Reference ranges for testosterone in men generated using liquid chromatography tandem mass spectrometry in a community-based sample of healthy nonobese young men in the Framingham Heart Study and applied to three geographically distinct cohorts. J Clin Endocrinol Metab 2011;96:2430–9.
Lunenfeld B., Mskhalaya G, Zitzmann M, Arver S, Kalinchenko S, Tishova Y, Morgentaler A. Recommendations on the diagnosis, treatment and monitoring of hypogonadism in men. Aging Male, 2015, 18, 1, 5–15.
Simoni M, Fanelli F, Roli L. Methodology for measuring testosterone, dihydrotestosterone and sex hormone binding globulin in a clinical setting, in: Nieschlag E, Behre HM, Nieschlag S (Eds.), Testosterone: Action, Deficiency,Substitution, 4th ed., Cambridge: Cambridge University Press, 2012, 60-86.

Dimopouloua C, Ceausub I, Depyperec H, Lambrinoudakid I, Muecke A, Pérez-Lópezf FR, Reesg M, van der Schouwh YT, Senturki LM, Simonsinij T, Stevensonk JC, Stutel P, Goulism DG. EMAS position statement: Testosterone replacement therapy in the aging male. Maturitas, 2015.
Короткова С.А., Богданова Е.А., Казначеева Т.В., Зубкова Н.А., Глыбина Т.М., Буллих А.В. Редкие заболевания в гинекологии: андрогенпродуцирующие опухоли яичников. Акушерство и гинекология. Медицинский вестник МВД, 2012, 2, 57, 38-42.

Dhindsa S, Reddy A, Karam JS, Bilkis S, Chaurasia A, Mehta A, Raja KP, Batra M, Dandona P. Prevalence of subnormal testosterone concentrations in men with type 2 diabetes and chronic kidney disease. Eur J Endocrinol. 2015 Sep;173(3):359-66. doi: 10.1530/EJE-15-0359.
Taylor AE, Keevil B, Huhtaniemi IT. Mass spectrometry and immunoassay: how to measure steroid hormones today and tomorrow. Eur J Endocrinol. 2015, 173(2):D1-12. doi: 10.1530/EJE-15-0338.

Исследование стероидного профиля крови методом тандемной масс-спектрометрии

Стероидные гормоны образуются из холестерина в процессе многочисленных превращений, каждый этап осуществляется под действием определенного фермента. Синтез осуществляется преимущественно в коре надпочечников. В процессе синтеза происходит дифференцировка стероидов на 3 вида: минералокортикоиды, глюкокортикоиды и половые гормоны.

Исследование стероидного профиля крови позволяет провести одновременную оценку уровня метаболитов (промежуточных продуктов) всех стероидных гормонов.

Для чего предназначено исследование стероидного профиля?

В рамках комплексного обследования заболеваний гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы и адреногенитального синдрома с целью выявления или исключения нарушений на уровне надпочечников.

Кому показано исследование?

Обычно обследуются пациенты со следующими проблемами:

Нарушения менструального цикла
Бесплодие
Синдром поликистозных яичников

Появление признаков гиперандрогении у женщин: рост волос на лице, белой линии живота, огрубение голоса, рост мышечной массы
Клинические признаки недостаточности функции надпочечников: повышенная слабость, быстрая утомляемость, снижение веса, тошнота, рвота, снижение АД вплоть до потери сознания

Что именно определяется в процессе анализа?

Уровень промежуточных метаболитов стероидных гормонов в процессе многоступенчатых превращений. Анализ выполняется методом тандемной масспектрометрии.

Состав профиля:

17-гидроксипрогестерон,
21-дезоксикортизол,
11-дезоксикортизол,
кортизон,
кортизол – отражают последовательные этапы синтеза глюкокортикоидов.
Кортикостерон и дезоксикортикостерон — промежуточные метаболиты альдостерона, характеризуют синтез минералокортикоидов
Прогестерон,
андростендион,
дегидроэпиандростерон,
тестостерон – характеризуют синтез половых гормонов.
17-ОН-прегненолон – предшественник всех стероидных гормонов

Что означают результаты исследования стероидного профиля?

Интерпретацией результатов занимается лечащий врач. Анализ уровня метаболитов позволяет врачу определить, на каком промежуточном этапе синтеза стероидных гормонов произошло нарушение и/или какой фермент перестал функционировать.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Сдаётся венозная кровь утром натощак, после 8-12 часов голода, воду пить в обычном режиме. За 48 часов рекомендуется отменить лекарственные препараты, содержащие эстрогены и андрогены, за сутки исключить тяжелые физические нагрузки и стрессы.

Анализ профиля стероидных гормонов (кровь, слюна) в Самаре, цены и расшифровка

Поскольку стероидные гормоны, это физиологически активные вещества, отвечающие в организме за основные процессы жизнедеятельности, то по результатам анализа можно выяснить, на каком звене цепи происходит сбой. Анализ по слюне дает уникальную возможность, определить истинную концентрацию свободных = активных гормонов.

Важно не просто сдать анализ, а сдать правильно. Поэтому запомните, что все стероидные гормоны – кортизол, эстрогены, андрогены и др. – нужно сдавать только методом МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЯ, где в качестве биоматериала должна использоваться только СЛЮНА!

Профиль стероидных гормонов (слюна)

Анализ проводится методом ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ

Что входит (состав профиля):
17-ОН-прогестерон, Андростендион, ДГЭА, Кортизон, Кортизол, Эстрадиол, Прогестерон, Тестостерон, Прегненолон.

⠀

Почему именно масс-спектрометрия?

⠀

Потому что классический метод ИФА, использующийся в других лабораториях для определения уровня стероидных гормонов, не корректен. Он не позволяет в процессе реакции «антиген-антитело» распознать количественные отличия всех стероидных гормонов – только лишь на глазок. Более того, значения на выходе получаются всегда завышенные. И получается, что по факту реальная картина искажена.

⠀

Почему именно слюна?

⠀

В крови гормоны почти полностью находятся в связанном с транспортными белками состоянии. Они НЕ активны, пока не дошли до ткани, где должны работать. Только там они освобождаются от белков и оказывают свое действие. А важно определение именно свободных (АКТИВНЫХ) гормонов, чтобы оценить истинную функциональную активность гормональной системы.

⠀

Клеточные мембраны слюнных желез являются природными разделительными фильтрами, и в слюнной проток проникают соединения только с низкой молекулярной массой (<400 Д), к которым как раз и относятся тестостерон и все другие стероиды, не связанные с альбумином и специфическим глобулином. ⠀ В нашей клинике вы можете сдать стероидный профиль слюны, который выполняется согласно всем условиям выше. Более того, каждый наш Д-доктор работает с этим анализом и задаст вам правильный вектор в терапии.

Как подготовиться к сдаче?

Для анализа не требуется специальной подготовки. Есть несколько условий для успешного проведения:

За 60 минут не курите, не употребляйте жевательный табак и курительные смеси.
За полчаса воздержитесь от еды, жевательной резинки, чистки зубов и использования предметов гигиены полости рта.

Оценка андрогенного статуса, узнать цены на комплекс анализов и сдать в Москве

Доступен выезд на дом

Онлайн-регистрация Тестостерон (Testosterone)

Тестостерон – основной андрогенный гормон. Тест используют в диагностике нарушений полового развития и гипогонадизма у мужчин; нарушений цикла, бесплодия, вирилизации у женщин; контроле терапии с применением тестостерона.

Дегидроэпиандростерон-сульфат (ДЭА-S04, ДЭА-С, Dehydroepiandrosterone sulfate, DHEA-S)

Дегидроэпиандростерон-сульфат является информативным лабораторным маркером андроген-синтетической активности надпочечников. Тест применяют при подозрении на избыток образования андрогенов, а также при симптомах аменореи, бесплодия или маскулинизации у женщин.

17-ОН-прогестерон (17-Hydroxyprogesterone, 17-OHP)

17-ОН-прогестерон – промежуточный стероид в биосинтезе глюкокортикоидов, андрогенов и эстрогенов. Исследование используют в диагностике врожденной гиперплазии надпочечников (врожденный адреногенитальный синдром).

Доступен выезд на дом

Онлайн-регистрация

Комплекс, используемый для оценки андрогенного статуса у женщин при диагностике причин гирсутизма, нарушений менструального цикла, бесплодия.

Доступен выезд на дом

Онлайн-регистрация

Строго натощак после ночного периода голодания от 8 до 14 часов. Накануне исследования необходимо исключить повышенные психо-эмоциональные и физические нагрузки (спортивные тренировки), приём алкоголя, за час до исследования — курение. При применении теста с целью динамического мониторинга терапии глюкокортикоидами желательно придерживаться одинакового периода после приема препарата.

Профили анализов на выявление заболеваний и проверку здоровья

Диагностика анемий

Комплекс тестов предназначен для дифференциальной диагностики анемий: железодефицитной, В12- и фолатдефицитной, анемии хронических заболеваний, специфической патологии системы крови. Результаты исследований можно использовать при выборе терапии.

Онкориск мужской: предстательная железа

Скрининговое обследование состояния предстательной железы (простаты), выявление простатита, аденомы, оценка риска злокачественных изменений. Мужчинам в возрасте 45 лет и старше проходить лабораторное обследование по этой программе рекомендуется регулярно.

Онкориск женский: шейка матки

Лабораторный скрининг для оценки риска и выявления предраковых и раковых изменений слизистой шейки матки. Позволяет выявить наличие клинически значимого количества онкогенных типов вируса папилломы человека (основная причина рака шейки матки), определить степень морфологических изменений слизистой, оценить общий риск злокачественных изменений.

Биохимия крови: расширенный профиль

Расширенное биохимическое обследование, помогающее сделать первичную оценку состояния здоровья, определить ход дальнейшего обследования. Для использования в рамках диспансерного обследования и по назначению врача.

Биохимия крови: минимальный профиль

Скрининговое биохимическое обследование, помогающее сделать первичную оценку состояния здоровья, определить ход дальнейшего обследования. Для использования в рамках диспансерного обследования и по назначению врача.

Биохимия крови: базовый профиль

Профиль включает основные биохимические тесты и позволяет оценить функцию печени, почек, обмен веществ. Это дает возможность провести первичную оценку общего состояния здоровья, а также определить ход дальнейшего обследования. Профиль предназначен для использования в рамках проведения профилактического медицинского обследования и по назначению врача.

Болезнь Вильсона-Коновалова, биохимические тесты (Wilson-Konovalov disease, biochemical tests)

Профиль предназначен для диагностики болезни Вильсона-Коновалова – тяжелого наследственного заболевания с аутосомно-рецессивным типом наследования, обусловленного нарушением внутриклеточного транспорта меди и накоплением ее в организме, что приводит к тяжелейшим болезням центральной нервной системы и внутренних органов.

Оценка андрогенного статуса

Хочу стать мамой: комплексное обследование при планировании беременности

В профиль входит комплекс тестов на гормоны, позволяющих выявить эндокринные дисфункции репродуктивной системы, базовый комплекс инфекционных маркеров для выявления потенциально опасных для плода инфекций и определения наличия иммунитета к TORCH-инфекциям, а также скрининговые биохимические и общеклинические тесты.

TORCH-инфекции

Комплекс исследований, в который входят лабораторные маркеры, позволяющие при планировании зачатия или во время беременности оценить наличие иммунитета к потенциально опасным для плода TORCH-инфекциям, а также выявить острую инфекцию.

Беременность: 1-й триместр (1-13 недели)

Комплекс тестов, которые рекомендованы при обследовании беременных в первом триместре. Исследования позволяют контролировать течение беременности, определить возможные осложнения и риски, исключить потенциально опасные для плода инфекции.

Беременность: 2-й триместр (14-28 недели)

Комплекс тестов, которые целесообразно выполнить при промежуточном мониторинге беременных во втором триместре для оценки функционирования органов и систем.

Беременность: 3-й триместр (от 29 – 40 недель)

Комплекс тестов, которые проводят при обследовании беременных в третьем триместре, предназначен для оценки функциональной активности внутренних органов беременной и готовности организма к родовой нагрузке, а также для исключения возможности инфицирования плода в процессе родов.

Подготовка к беременности: базовый

Лабораторные исследования в рамках прегравидарной подготовки включают диагностику бактериального вагиноза и ИППП, наличие иммунитета к TORCH-инфекциям, определение группы крови и резус-фактора, клинические и биохимические анализы крови, оценку функции щитовидной железы.

Подготовка к беременности: оценка витаминного статуса

Профиль «Подготовка к беременности: оценка витаминного статуса» предназначен для выявления дефицита витаминов D, В9 и В12 в процессе прегравидарной подготовки. Результаты обследования можно использовать для коррекции пищевого рациона и снижения возможных рисков, связанных с их недостатком.

Анализы для детского сада и школы

Программа обследования ребенка предназначена для прохождения перед поступлением в детский сад или школу. Результаты этих исследований необходимы для получения медицинской справки по утвержденной Минздравом РФ форме 026У.

Оценка иммунного ответа к детским инфекциям

Программа содержит ряд тестов, позволяющих оценить наличие у ребенка иммунитета к наиболее распространенным детским инфекциям (вследствие перенесенного заболевания или вакцинации). Данный профиль будет полезен и в том случае, если у родителей отсутствует информация о перенесенных ребенком заболеваниях, или в медицинской карте не хватает данных о необходимых прививках.

Анализы для детского сада и школы (1601)

ИНБИОФЛОР. Выявление возбудителей ИППП(4+КВМ)

Комплекс тестов для диагностики бактериального вагиноза − инфекционного невоспалительного синдрома полимикробной этиологии, развивающегося из-за изменения соотношения нормальной и условно-патогенной микрофлоры влагалища.

ИНБИОФЛОР. Условно-патогенные микоплазмы, скрининг

ВИЧ, сифилис, гепатиты В, С

Комплексное лабораторное скрининговое обследование на гепатиты B и C, ВИЧ-инфекцию 1 и 2 типов и сифилис.

Секс в большом городе: 14 инфекций + мазок на микрофлору

Комплексное обследование, позволяющее оценить качественный и количественный состав микрофлоры урогенитального тракта, определить состояние нормофлоры, выявить абсолютные патогены и условно-патогенные микроорганизмы.

VIP-обследование для женщин

Комплекс тестов, предназначенный для профилактического обследования женщин. В комплекс входят общеклинические, базовые биохимические, гормональные исследования, а также маркеры инфекций, позволяющие судить о состоянии иммунитета по отношению к ним и/или наличии определенных заболеваний.

VIP-обследование для мужчин

Комплекс тестов, предназначенный для профилактического обследования мужчин. В комплекс входят общеклинические, базовые биохимические, гормональные исследования, а также маркеры инфекций, позволяющие судить о состоянии иммунитета по отношению к ним и/или наличии определенных заболеваний.

Аллергия на пищевые продукты

Комплекс тестов (общий и специфические IgE), использующийся для выявления сенсибилизации к различным пищевым аллергенам.

Аллергия на плесень

Комплекс тестов (общий и специфические IgE), использующийся для выявления сенсибилизации к аллергенам плесени.

Аллергия на растения

Комплекс тестов (общий и специфические IgE), использующийся для выявления сенсибилизации к аллергенам пыльцы трав и деревьев.

Большой скрининг элементного состава ногтей

Диагностический профиль, который включает в себя максимальный перечень определяемых макро- и микроэлементов. Рекомендуется как профилактическое исследование или в рамках программы общей диагностики.

Токсичные и эссенциальные микроэлементы в ногтях

Тесты, входящие в состав профиля, позволяют выявить или исключить длительную существующую интоксикацию основными токсичными микроэлементами, а также интоксикацию при избыточном накоплении ряда эссенциальных микроэлементов в организме.

Токсичные микроэлементы в ногтях

Тесты, входящие в состав профиля, позволяют выявить или исключить длительную существующую интоксикацию основными токсичными микроэлементами.

Токсичные микроэлементы в волосах

Эссенциальные (жизненно необходимые) и токсичные микроэлементы в моче

Профиль выполняют для подтверждения интоксикаций при избыточном накоплении ряда микроэлементов в организме (как токсичных, так и некоторых эссенциальных, присутствующих в токсических концентрациях), а также для контроля за течением заболеваний обмена веществ, приводящим к потерям эссенциальных микроэлементов.

Токсичные микроэлементы (тяжёлые металлы) в цельной крови

Тесты, входящие в профиль, направлены на выявление самых токсичных и наиболее распространенных в окружающей среде тяжелых металлов. Профиль рекомендован на предмет скрининга (в т. ч. массового) с целью выявления интоксикаций этими микроэлементами.

Красота здоровой кожи

Тесты, входящие в данный профиль, помогут оценить состояние эндокринной системы, выявить возможный гормональный дисбаланс и определить его влияние на здоровье кожи.

Нейротропные витамины

Профиль предназначен для оценки уровня в крови основных витаминов группы В, необходимых для нормального функционирования нервной системы.

Вегетарианцы

Разработанный специально для вегетарианцев комплекс анализов поможет оценить питание с точки зрения полноценности и достаточности, выявить его возможное влияние на отдельные показатели крови (общий белок, кальций, фосфор, ферритин, витамины В12 и D), важные для обеспечения функции кроветворной, костно-мышечной и нервной систем.

Питание, исключающее красное мясо

Тесты, входящие в профиль, направлены на выявление дефицита белка и витамина В12 с целью определения возможных причин последствий несбалансированного питания.

Белковая диета

Комплекс анализов, разработанный специально для поклонников белковых диет, поможет оценить полноценность такого питания, определить его влияние на состав крови, на состояние выделительной системы и опорно-двигательного аппарата.

Профиль Веганы «Минимальный»

Профиль включает минимальный набор исследований для людей, придерживающихся веганского типа питания, полностью исключающего продукты животного происхождения из рациона.

Профиль Веганы «Базовый»

Профиль включает базовый набор исследований для людей, придерживающихся веганского типа питания, полностью исключающего продукты животного происхождения из рациона.

Профиль Веганы «Расширенный»

Профиль включает расширенный набор исследований для людей, придерживающихся веганского типа питания, полностью исключающего продукты животного происхождения из рациона.

Перед диетой: минимальное обследование

Тесты, входящие в состав профиля, позволяют определить наиболее частую причину повышения массы тела, выявить лабораторные признаки нарушения функции щитовидной железы, оценить необходимость дополнительного обследования, индивидуальной коррекции диеты, эффективность диетотерапии.

Перед диетой: дополнительное обследование

Тесты, входящие в состав профиля, дают возможность оценить состояние органов и систем организма, исключить вторичный характер ожирения на фоне заболеваний, приводящих к нарушению обмена веществ, выработать индивидуальный подход к составлению программы похудения с учетом имеющихся ограничений и отдельных противопоказаний, обусловленных текущим состоянием здоровья.

Подготовка к диете, профиль «Базовый»

Исследования, входящие в состав профиля, дают возможность провести предварительную оценку метаболизма, выявить возможные причины его нарушений. Профиль может быть рекомендован людям, принявшим решение вести здоровый образ жизни, контролировать массу тела, заниматься фитнесом/спортом.

Подготовка к диете, профиль «Расширенный»

Исследования, входящие в состав профиля, направлены на оценку состояния здоровья тех, кто целенаправленно занимается снижением массы тела. Включает в себя тесты, которые помогут выявить причины ее увеличения и определить, какими продуктами питания, витаминами и минералами следует дополнить рацион.

SuperSport — Базовый

Исследования, входящие в состав профиля, позволяют оценить исходное состояние здоровья до старта тренировок и его изменение под влиянием физических нагрузок в начале тренировок.

SuperSport — Оптимальный

Исследования, входящие в состав профиля, целесообразно выполнять при регулярных и активных физических нагрузках для детального отслеживания изменений, происходящих в организме, сравнения их с результатами предыдущего лабораторного исследования и, при необходимости, корректировки режима тренировок.

SuperSport — Продвинутый

Исследования, входящие в состав профиля, проводят с целью полного комплексного обследования, мониторинга реакции организма на серьезные и продолжительные нагрузки и степени последующего восстановления.

Спортсмены, бодибилдеры (коррекция состава тела)

Исследования, входящие в состав профиля, помогут оценить влияние на здоровье «жесткого» режима питания с ограничением углеводов и жиров («сушки», «быстрые» диеты, применение жиросжигателей), его воздействие на эндокринную, выделительную, костно-мышечную и сердечно-сосудистую системы, на детоксикацию продуктов обмена.

Гипогонадизм у мужчин

Профиль «Гипогонадизм у мужчин» предназначен для выявления андрогенной недостаточности у мужчин.

Перед назначением антикоагулянтов (Before prescribing anticoagulants)

Профиль «Перед назначением антикоагулянтов» предназначен для оценки состояния свертывающей системы крови, печени и почек перед назначением антикоагулянтной терапии. Комплекс также может быть рекомендован для динамического наблюдения за состоянием пациентов, получающих антикоагулянтную терапию.

Что такое ДГЭА и почему этот гормон надо беречь | Vogue Ukraine

ДГЭА – пожалуй, самый важный гормон, о котором мало кто знает и который мало кто контролирует. А зря. Его дефицит грозит снижением иммунитета, ухудшением работы сосудов и сердца, снижением метаболизма и, как следствие, набором веса. Недостаток ДГЭА может привести также к развитию диабета и остеопороза.

Фото: David Ferrua, архив Vogue

Текст: Марина Сютаева

«Ой, что-то у меня с кожей в последнее время совсем плохо. Старая стала, сухая, вокруг рта морщинки появились. Может, мне мезо поколоть? Гиалуронки не хватает?» – атакую вопросами косметолога, к которой пришла разобраться, с чего вдруг моя кожа за каких-то полгода достигла состояния крафтовой бумаги. Хотя, по идее, до него у меня должно быть еще лет двадцать в запасе.

Врач внимательно рассматривает мое лицо и вместо инъекций отправляет меня на прием к эндокринологу. Та, в свою очередь, выписывает направление на анализ крови под названием «мультистероидный профиль», куда входит исследование уровня женских и мужских половых гормонов, кортизона и кортизола, а также незнакомого мне дегидроэпиандростерона, он же ДГЭА. Сложное название, впрочем, я быстро запоминаю – его уровень в моем организме критически низкий. При норме 15-65 нмоль/л мой показатель составляет ничтожные 4,3.

По глазам врача видно: такой расклад ее не радует. Неудивительно, ведь ДГЭА – хоть и не общеизвестное вещество вроде витамина С, но крайне важное для здоровья. Медики называют его «прародителем гормонов», так как он стимулирует синтез тестостерона, эстрогена и всех половых и стероидных гормонов.

Уровень ДГЭА в организме довольно быстро начинает снижаться уже после 25 лет. В 50 лет его содержание составляет половину от нормы, а в 70 лет – всего около 20%. Его дефицит грозит снижением иммунитета, ухудшением работы сосудов и сердца, снижением метаболизма и, как следствие, набором веса. Недостаток ДГЭА может привести также к развитию диабета и остеопороза.

Если вспомнить «половую» функцию дегидроэпиандростерона, станет ясно, что он напрямую влияет на фертильность и либидо. И наконец, от недостатка ДГЭА страдает кожа: теряет влагу, упругость, эластичность. Появляются преждевременные признаки старения, причем не только видимые. Что касается психологических рисков, дефицит ДГЭА провоцирует эмоциональный спад, чувство усталости и угнетенности, вплоть до депрессии.

«Убить» уровень ДГЭА легко. Я, например, со своим расправилась с помощью физической и моральной перегрузки: параллельно основной работе запускала сложный проект, который требовал много сил и времени. Три месяца подряд поспать удавалось 3-4 часа в сутки, поесть – через раз. Сто процентов времени я проводила в состоянии стресса.

В итоге, кроме «старой» кожи у меня появилось еще несколько тревожных симптомов, вообще не характерных для моего возраста: тахикардия, одышка, усталость. Ночью я несколько часов не могла заснуть, а утром – собрать себя в кучу и встать с кровати. На работе отключался мозг, в быту не хватало сил даже помыть посуду. Плюс тревожность, апатия на ровном месте – и да, либидо я тоже уничтожила.

По совету врача я начала принимать ДГЭА в биодобавке, которую заказала онлайн (название и дозировку здесь не указываю, препарат должен назначать врач по результатам анализа). За год уровень гормона повысился втрое, хотя до нормы так и не дотянул, тормознув на отметке 11.

Тогда на очередном приеме эндокринолог посоветовала мне провести эксперимент: принимать ДГЭА не внутрь, потому что в желудочно-кишечном тракте он может усваиваться недостаточно хорошо, – а наружно. Я купила специальный крем для тела с маркировкой DHEA для поддержания баланса ДГЭА (его обычно назначают, когда надо «подтянуть» уровень ДГЭА, но таблетки-биодобавки на его основе плохо помогают) и начала наносить на кожу рук и ног. Спойлер: кожа там теперь – ммм! Жаль, на лицо мазать нельзя.

Эффект ощутила через месяц: утром я больше не размазня, мозг включился, засыпаю-просыпаюсь нормально, чувствую себя человеком, а не зомби. До нормы я таки не дотянула – показатель ДГЭА все еще 13,5. Но все же это победа. И еще одна — в моем графике больше нет работы 24/7.

Анализы крови

Анализы крови при выпадении волос

Лабораторные анализы крови назначаются при необходимости для уточнения диагноза или для исключения факторов, утяжеляющих течение основного процесса (при очаговой алопеции или андрогенетической алопеции).

Существует ряд анализов крови, выполнение которых считается обязательным при выпадении волос у женщин. Это анализы крови для исключения анемии и латентного железодефицита, нарушения функции щитовидной железы.

При неправильном, несбалансированном питании, диете с целью снижения массы тела могут потребоваться анализы крови для исключения дефицита белка, микроэлементов.

При подозрении на влияние андрогенов (мужских гормонов) на потерю волос необходимо исследовать функцию надпочечников и яичников, определить обмен андрогенов в организме, выполнив мультистероидный профиль крови (11 показателей андрогенов).

При нерегулярном менструальном цикле, гирсутизме, бесплодии, нарушении массы тела назначаются половые гормоны, отражающие функцию гипофиза, надпочечников, яичников, оценивается уровень инсулина.

Иногда (например, при назначении системной терапии) требуются анализы крови для оценки функции печени и почек.

Какой анализ крови сдать?

В ряде случаев пациенты просят по телефону сказать, какие анализы можно сделать, чтобы первичный прием был максимально полным. Здесь необходимо понимать, что универсального списка анализов крови не существует.

Однако для Вашего удобства мы сформировали так называемый «трихологический минимум», который могут заочно сдать пациенты в следующих случаях:

Женский пол —

отсутствие хронических заболеваний
регулярный менструальный цикл, отсутствие гирсутизма и акне
жалобы на выпадение и поредение волос, отсутствие очагов потери волос.

Анализы для «трихологического минимума» — клинический анализ крови,ферритин, железо, ОЖСС, анализ крови/волос на минеральный обмен (23 микроэлемента), ТТГ и Т4 св., витамин Д-25-ОН, Hbs-Ag, anti-HCV, RW, ат к ВИЧ 1,2.

Анализ волос на микроэлементы можно посмотреть здесь.

Однако остается вероятным, что в вашем случае этих анализов может быть не достаточно, или, наоборот, часть из них вам сдавать нет необходимости.

Multisteroid LC-MS / MS assay для глюкокортикоидов и андрогенов и его применение при болезни Аддисона

Задача: Жидкостная хроматография-масс-спектрометрия (ЖХ-МС / МС) обеспечивает превосходную аналитическую специфичность по сравнению с иммуноанализами, но недоступна во многих регионах и больницах из-за дорогостоящего оборудования и утомительной подготовки проб. Таким образом, мы разработали автоматизированный высокопроизводительный анализ LC-MS / MS для одновременной количественной оценки 10 эндогенных и синтетических стероидов, направленных на заболевания гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой оси и гонад.

Методы: Дейтерированные внутренние стандарты добавляли к 85 мкл сыворотки и обрабатывали методом жидкостно-жидкостной экстракции. Кортизол, кортизон, преднизолон, преднизон, 11-дезоксикортизол, дексаметазон, тестостерон, андростендион и прогестерон были разделены хроматографией сверхвысокого давления на колонке с обращенной фазой за 6,1 минуты и обнаружены трехквадрупольным МС. Метод был использован для оценки стероидных профилей у женщин с болезнью Аддисона (AD, n = 156) и доноров крови (BD, n = 102).

Полученные результаты: Прецизионность составляла 4,5-10,1% RSD, точность 95-108% и извлечение 60-84%. Метод практически не имел матричных эффектов и устойчив к индивидуальным различиям в составе сыворотки. Большинство женщин с БА в постменопаузе имели чрезвычайно низкий уровень андростендиона ниже 0,14 нмоль / л и средний уровень тестостерона 0,15 нмоль / л [межквартильный диапазон 0,00-0,41], что значительно ниже, чем у женщин с БА в постменопаузе (1.28 нмоль / л [0,96–1,64] и 0,65 нмоль / л [0,56–1,10] соответственно). Женщины с AD в фертильном возрасте получали андростендион 1,18 нмоль / л [0,71–1,76] и тестостерон 0,44 нмоль / л [0,22–0,63], примерно половину уровней, обнаруженных в BD соответствующего возраста.

Заключение: Этот анализ LC-MS / MS обеспечивает высокочувствительные и специфические оценки глюкокортикоидов и андрогенов с небольшими объемами образцов и подходит для эндокринных лабораторий и исследований.Его полезность была продемонстрирована на большой группе женщин с AD, и данные свидетельствуют о том, что женщины с AD особенно страдают дефицитом андрогенов после менопаузы.

(PDF) Мультистероидный анализ LC – MS / MS на глюкокортикоиды и андрогены и его применение в спектрометрическом анализе болезни Аддисона

для андростендиона, дегидроэпиандростерона и

тестостерона с эталонными интервалами для детей и взрослых. Клиническая

Химия 2010 56 1138–1147.(DOI: 10.1373 / Clinchem.2010.143222)

9 Hempen C, Elfering S, Mulder AHL, van den Bergh FAJTM и

Maatman RGHJ. Тест подавления дексаметазона: разработка метода

для одновременного определения кортизола и дексамета-

сон в плазме человека методом жидкостной хроматографии / тандемной масс-спектрометрии

. Анналы клинической биохимии 2012 49 170–176.

(doi: 10.1258 / acb.2011.011004)

10 Асвольд Б.О., Гриль V, Торстенсен К. и Бьоргаас MR.Связь между концентрациями дексаметазона

после теста и кортизола в тесте подавления дексаметазона в течение ночи в дозе 1 мг

. Эндокринные связи 2012

1 62–67. (DOI: 10.1530 / EC-12-0047)

11 Laverdie

re I, Caron P, Couture F, Le

vesque E & Guillemette C. Жидкость

хроматография – тандемная масс-спектрометрия (ЖХ – МС / МС) метод для

мониторинга воздействия лекарств на трансплантаты гемопоэтических стволовых клеток

реципиентов.Журнал хроматографии. B, Аналитические технологии в

Биомедицины и науки о жизни 2012 885–886 131–137. (DOI: 10.1016 /

j.jchromb.2011.12.029)

12 Sæves I, Line P-D & Bergan S. Фармакокинетика преднизолона

и преднизона у взрослых реципиентов трансплантата печени в начале после трансплантации

. Терапевтический мониторинг лекарственных средств 2012 34 452–459.

(doi: 10.1097 / FTD.0b013e31825ee3f8)

13 Матушевски Б.К., Констанцер М.Л. и Чавес-Энг CM.Стратегии

оценки матричного эффекта в количественных биоаналитических методах на основе

на ВЭЖХ – МС / МС. Аналитическая химия 2003 75 3019–3030.

(DOI: 10.1021 / ac020361s)

14 Матушевский Б.К. Наклон стандартной линии как мера относительного матричного эффекта

в количественном биоанализе ВЭЖХ – МС. Журнал хроматографии.

B, Аналитические технологии в биомедицине и науках о жизни 2006 830

293–300. (DOI: 10.1016 / j.jchromb.2005.11.009)

15 Erichsen MM, Husebye ES, Michelsen TM, DahlAA & Løva

s K. Сексуальность и

фертильность у женщин с болезнью Аддисона. Журнал клинической эндокринологии

и метаболизм 2010 95 4354–4360. (DOI: 10.1210 / jc.2010-0445)

16 Финдлинг Дж. У., Рафф Х. и Арон, округ Колумбия. Тест подавления низких доз дексаметазона

: переоценка у пациентов с синдромом Кушинга.

Журнал клинической эндокринологии и метаболизма 2004 89 1222–1226.

(DOI: 10.1210 / jc.2003-030207)

17 Ниман Л.К., Биллер БМК, Финдлинг Дж. У., Ньюэлл-Прайс Дж., Сэвидж, Миссури,

Стюарт П.М. и Монтори В.М. Диагноз синдрома Кушинга:

Руководство по клинической практике эндокринного общества. Журнал клинической эндо-

кринологии и метаболизма 2008 93 1526–1540. (DOI: 10.1210 / jc.2008-0125)

18 Morton JM, Williamson S, Kear LM, McWhinney BC, Potter J &

Glanville AR. Терапевтический лекарственный мониторинг преднизолона после трансплантации легкого

.Журнал трансплантации сердца и легких, 2006 г. 25

557–563. (DOI: 10.1016 / j.healun.2005.11.460)

19 Hill MR, Szeer SJ, Ball BD, Bartoszek M & Brenner AM. Мониторинг

Глюкокортикоидная терапия: фармакокинетический подход. Клиническая Фарма-

Кологи и терапия 1990 48 390–398. (DOI: 10.1038 / clpt.1990.167)

20 Поттер JM, McWhinney BC, Sampson L & Hickman PE. Area-under-

мониторинг кривой преднизолона для оптимизации дозы в стабильной популяции почечных трансплантатов

.Терапевтический мониторинг лекарственных средств 2004 26

408–414. (DOI: 10.1097 / 00007691-200408000-00011)

21 Taieb J, Mathian B, Millot F, Patricot MC, Mathieu E, Queyrel N,

Lacroix I, Somma-Delpero C & Boudou P. Тестостерон измеряется 10

иммуноанализов и методом газовой хроматографии с изотопным разбавлением — масс-спектрометрия

в сыворотках 116 мужчин, женщин и детей. Клиническая

Химия 2003 49 1381–1395. (DOI: 10.1373 / 49.8.1381)

22 Ионита И.А., Фаст ДМ и Ахлаги Ф.Разработка чувствительного и селективного

метода количественного анализа кортизола, кортизона,

преднизолона и преднизона в плазме крови человека. Журнал

Хроматография. Б. Аналитические технологии в биомедицине и жизни

Науки 2009 877 765–772. (DOI: 10.1016 / j.jchromb.2009.02.019)

23 Кушнир М.М., Роквуд А.Л., Нельсон Г.Дж., Юэ Б. и Урри Ф.М. Оценка аналитической специфичности

в количественном анализе с использованием тандемной масс-спектрометрии

.Клиническая биохимия 2005 38 319–327. (DOI: 10.1016 /

j.clinbiochem.2004.12.003)

24 Vogeser M & Seger C. Подводные камни, связанные с использованием жидкостной хроматографии-

raphy – тандемной масс-спектрометрии в клинической лаборатории. Клиническая

Химия 2010 56 1234–1244. (DOI: 10.1373 / Clinchem.2009.138602)

25 Кушнир М.М., Роквуд А.Л., Бергквист Дж. Жидкостная хроматография —

Применение тандемной масс-спектрометрии в эндокринологии. Mass

Spectrometry Reviews 2010 29 480–502.(DOI: 10.1002 / mas.20264)

26 Карвалью В.М. Наступление эпохи жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией

в эндокринологической лаборатории. Журнал

Хроматография. B, Аналитические технологии в биомедицине и жизни

Science 2012 883–884 50–58. (doi: 10.1016 / j.jchromb.2011.08.027)

27 Ван С., Циронак М. и Янг Э. Всегда ли стабильный внутренний стандарт

, меченный изотопами, корректирует реакцию аналита? Исследование матричного эффекта

методом ЖХ / МС / МС для определения энантио-

меров карведилола в плазме человека. Журнал фармацевтического и биомедицинского анализа

2007 43 701–707.(DOI: 10.1016 / j.jpba.2006.08.010)

28 Burger HG. Продукция андрогенов у женщин. Фертильность и бесплодие 2002

77 (Дополнение 4) S3 – S5. (DOI: 10.1016 / S0015-0282 (02) 02985-0)

29 Fogle RH, Stanczyk FZ, Zhang X & Paulson RJ. Выработка андрогенов яичников

у женщин в постменопаузе. Журнал клинической эндокринологии

и метаболизм 2007 92 3040–3043. (DOI: 10.1210 / jc.2007-0581)

30 Couzinet B, Meduri G, Lecce MG, Young J, Brailly S, Loosfelt H,

Milgrom E & Schaison G.Яичник в постменопаузе не является основной железой, вырабатывающей андрогены. Журнал клинической эндокринологии и обмена веществ

2001 86 5060–5066. (DOI: 10.1210 / jc.86.10.5060)

31 Arlt W, Callies F, van Vlijmen JC, Koehler I, Reincke M, Bidlingmaier M,

Huebler D, Oettel M, Ernst M, Schulte HM et al. Дегидроэпиандрос-

Замена терона у женщин с недостаточностью надпочечников. Новая Англия

Медицинский журнал 1999 341 1013–1020. (DOI: 10.1056 /

NEJM199909303411401)

32 Løva

s K, Gebre-Medhin G, Trovik TS, Fougner KJ, Uhlving S. O & Husebye ES.Замена

дегидроэпиандростерона при надпочечниковой недостаточности: нет пользы для субъективного

состояния здоровья и сексуальности в 9-месячном рандомизированном клиническом исследовании

в параллельных группах. Журнал клинической эндокринологии и метаболизма 2003 88

1112–1118. (DOI: 10.1210 / jc.2002-020769)

33 Alkatib AA, Cosma M, Elamin MB, Erickson D, Swiglo BA, Erwin PJ &

Montori VM. Систематический обзор и метаанализ рандомизированных

плацебо-контролируемых исследований влияния лечения DHEA на качество жизни у

женщин с недостаточностью надпочечников.Журнал клинической эндокринологии и обмена веществ

2009 94 3676–3681. (DOI: 10.1210 / jc.2009-0672)

34 Gebre-Medhin G, Husebye ES, Mallmin H, Helstro

mL, BerneC,

Karlsson FA & Ka

mpe O. Oral дегидроэпиандростерон (DHEA)

Заместительная терапия у женщин с болезнью Аддисона. Клиническая

Эндокринология 2000 52 775–780. (DOI: 10.1046 / j.1365-2265.2000.01017.x)

35 Gurnell EM, Hunt PJ, Curran SE, Conway CL, Pullenayegum EM,

Huppert FA, Compston JE, Herbert J & Chatterjee VKK.Долгосрочная замена

DHEA при первичной недостаточности надпочечников: рандомизированное контролируемое исследование

. Журнал клинической эндокринологии и метаболизма 2008 93

400–409. (DOI: 10.1210 / jc.2007-1134)

36 Christiansen JJ, Bruun JM, Christiansen JS, Jørgensen JO &

Gravholt CH. Долгосрочная замена DHEA у женщин надпочечников

Отказ, состав тела, функция мышц и метаболизм костей:

рандомизированное исследование. Европейский журнал эндокринологии, 2011 г. 165 293–300.

(DOI: 10.1530 / EJE-11-0289)

Получено в окончательной форме 7 июня 2013 г.

Принято 12 июня 2013 г.

Эндокринные соединения

Research

P Methlie et al. Определение стероидов методом

LC – MS / MS

12–12 2: 136

http://www.endocrineconnections.org

DOI: 10.1530 / EC-13-0023

Ñ 2013 Авторы

Опубликованы by Bioscienti ca Ltd

Эта работа находится под лицензией Creative Commons

с авторством 3.0 Непортированная лицензия.

Революция в диагностике заболеваний надпочечников: быстрое мультиплексное количественное определение сывороточных стероидов с помощью тандемной масс-спектрометрии (МСМС) | ICEECE2012 | 15-й Международный и 14-й Европейский конгресс эндокринологов

Контекст: биологическая диагностика заболеваний надпочечников в настоящее время основана на количественном определении сывороточных стероидов с использованием автоматизированных иммуноанализов. Этим прямым анализам часто не хватает необходимой точности и точности, а межлабораторные исследования показывают, что рабочие характеристики МСМС намного лучше, чем у автоматических иммуноанализов.

Метод: после жидкостной хроматографии экстрактов сыворотки стероиды были количественно определены на масс-спектрометре Waters QuattroPremier либо путем нацеливания на несколько информативных стероидов для диагностики врожденной гиперплазии надпочечников (CAH), либо путем установления полного стероидного профиля с использованием мультистероид-CHS- комплект от PerkinElmer.

Субъекты: Группа 1: 10 субъектов с подозрением на опухоль надпочечников (гирсутизм и аномальные ультразвуковые изображения), Группа 2: 26 новорожденных с подозрением на ХАГ (положительный результат скрининга и / или гипогликемия), Группа 3: 10 недоношенных новорожденных, положительных при неонатальном скрининге), Группа 4: 10 новорожденных женского пола с изолированным увеличением клитора.

Результаты: Группа 1: полный профиль, включающий глюкокортикоиды, минералокортикоиды и андрогены, за один проход идентифицировал патологический секреторный паттерн с повышенными уровнями DHEA-сульфата, андростендиона и предшественников кортизола. Группа 2: у 19 новорожденных были нормальные уровни кортизола и предшественников кортизола, что исключает диагноз ХАГ, у 6 новорожденных был повышенный уровень 17-гидроксипрогестерона, с низким уровнем кортизола, что указывает на дефект 21-гидроксилазы, у 1 новорожденного был повышенный уровень 11-дезоксикортизола и андростендиона. уровень кортизола ниже нормы, данные соответствуют блокаде 11-гидроксилазы.Группа 3: мультистероидный анализ показал умеренно повышенный уровень 17-гидроксипрогестерона по сравнению с доношенными новорожденными, с очень высокими уровнями DHEA-сульфата и нормальными уровнями кортизола. Те же субъекты имели нормальный стероидный профиль в возрасте 3 месяцев. Группа 4: профиль 10 сывороточных стероидов был нормальным, что исключает нарушение секреции половых стероидов.

Заключение. Быстрые мультистероидные анализы за один проход с использованием MSMS позволяют подтвердить или опровергнуть диагноз опухоли надпочечников или ХАГ в течение нескольких минут.В то же время это позволяет избежать ненужной терапии, сократить отсрочку начала лечения и значительно сократить затраты на исследования.

Заявление об интересах: авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов, который мог бы быть воспринят как наносящий ущерб беспристрастности исследовательского проекта.

Финансирование: Эта работа была поддержана, однако подробности о финансировании недоступны.

Оценка биохимического гиперандрогении у PCO с помощью жидкостной хроматографии, тандемной масс-спектрометрии с использованием мультистероидного набора: основное внимание уделяется тестостерону и андростендиону | ECE2019 | 21-й Европейский конгресс эндокринологов

¹ Отделение эндокринологии, Fondazione IRCCS Ca ’Granda Ospedale Maggiore Policlinico, Милан, Италия; ² Лаборатория токсикологии Фонда IRCCS Ca ’Granda Ospedale Maggiore Policlinico, Милан, Италия; ³ Департамент клинических наук и общественного здравоохранения Миланского университета, Милан, Италия; ⁴ Отделение заболеваний костного метаболизма и диабета и лаборатория эндокринных и метаболических исследований IRCCS Istituto Auxologico Italiano, Милан, Италия; ⁵ Клиническая лаборатория, Fondazione IRCCS Ca ’Granda Ospedale Maggiore Policlinico, Милан, Италия; ⁶ Отделение бесплодия, Fondazione IRCCS Ca ’Granda Ospedale Maggiore Policlinico, Милан, Италия.

Цель: Выявление гиперандрогении является краеугольным камнем для оценки синдрома поликистозных яичников (СПК). Однако его определение всегда вызывало беспокойство, в основном из-за низкой точности, демонстрируемой стандартными анализами на андрогены. Как указано в литературе, применение более точных методов измерения стероидов (таких как тандемная масс-спектрометрия жидкостной хроматографии, ЖХ-МС / МС) могло бы улучшить диагностику. Целью нашего исследования является оценка влияния оценки тестостерона (T) и андростендиона (A) с помощью LC / MS-MS с использованием набора мультистероидов в диагностике PCO и при отнесении к различным клиническим фенотипам.

Дизайн: мы включили 98 последовательных пациентов (24,2 ± 6,2 года), направленных с подозрением на ЗКН (нарушения менструального цикла, гирсутизм, алопеция). 10 пациентов были исключены из-за другого диагноза. Т и А измеряли как с помощью стандартного анализа (ECLIA и CLIA, соответственно), так и с помощью мультистероидного набора LC-MS / MS у 88 включенных субъектов. Регистрировали клинические и биохимические параметры, связанные с метаболическим риском (артериальное давление, ИМТ, объем талии, глюцидный и липидный обмен). 34 добровольца европеоидной расы с эуменореей в пременопаузе без клинической гиперандрогении служили контрольной группой для определения референсных диапазонов T и A LC-MS / MS.

Результаты: Согласно Роттердамскому консенсусу, на основе измерения T с помощью ECLIA СПКЯ было подтверждено у 65 из 88 субъектов: 87,7% имели олигоаменорею, 84,6% имели клинический гиперандрогенизм, 63% имели поликистоз яичников и 54% — высокий уровень АМГ. При измерении T методом LC-MS / MS PCO были диагностированы у 67/88 субъектов. Высокий T (HT) был обнаружен у 43% и 56,7%, в то время как высокий A (HA) был обнаружен у 47,6% и 59,7% пациентов с PCO соответственно с помощью стандартных анализов и LC-MS / MS. По данным LC-MS / MS 19 (28,4%) пациентов были нормоандрогенными, 8 (11.9%) имели HT, 10 (14%) HA и 30 (44,8%) HT + HA. Стандартные анализы ошибочно классифицировали 15 пациентов как нормоандрогенных. Пациенты с гиперандрогенными PCO по данным LC-MS / MS показали более высокий уровень общего холестерина, чем нормоандрогенные (161,8 ± 32,9 против 144,8 ± 28,7 соответственно, P = 0,05), метаболизм глюкозы и клинические параметры были сопоставимы. При стандартной диагностике гиперандрогении между двумя группами не наблюдалось никакой разницы.

Выводы. ЖХ-МС / МС более чувствительны, чем обычные методы определения биохимической гиперандрогении у пациентов с СПК.У этих пациентов метаболический профиль несколько хуже. Независимо от используемого метода измерения, андроген A является наиболее часто повышенным в нашей когорте пациентов с PCO.

От простого стероида к стероидому: тенденции и аналитические проблемы

https://doi.org/10.1016/j.jsbmb.2020.105797Получить права и контент

Основные моменты

•: Анализ стероидов в качестве ключевого чтения- для диагностики и наблюдения за многочисленными эндокринными патологиями.
•: Подготовка проб, селективность и чувствительность остаются непростыми шагами.
•: Необходимо оценить компромисс между точностью количественной оценки и пропускной способностью.
•: Различные рабочие процессы могут дать дополнительную информацию о расширенном профиле стероидов.

Реферат

Вот уже несколько десятилетий анализ стероидов является ключевым инструментом в диагностике и мониторинге многочисленных эндокринных патологий. Таким образом, доступные методы, используемые для анализа стероидов в биологических образцах, со временем резко эволюционировали, следуя быстрому развитию технологий и научных знаний.Этот обзор направлен на синтез достижений в анализе стероидов, от классических подходов, учитывающих только несколько стероидов или ограниченное количество стероидных соотношений, до новых стратегий профилирования стероидов (стероидомики), контролирующих большие наборы стероидов в биологических матрицах. В этом контексте использование жидкостной хроматографии в сочетании с масс-спектрометрией стало методом выбора для одновременного определения большого количества стероидов, включая метаболиты фазы II, из-за его чувствительности и надежности.Однако большой динамический диапазон, который необходимо охватить, низкое естественное содержание некоторых ключевых стероидов, селективность аналитических методов, протоколов экстракции и ионизация стероидов остаются некоторыми из текущих проблем в стероидном анализе. В этом обзоре представлен обзор различных аналитических рабочих процессов, доступных в зависимости от количества исследуемых стероидов. Особое внимание уделяется обработке образцов, стратегии сбора, обработке данных, идентификации стероидов и количественному определению с использованием подходов ЖХ-МС.В этой работе также показано, как наличие стероидных стандартов, необходимость дополнительных аналитических стратегий и улучшение подходов к калибровке имеют решающее значение для достижения полной количественной оценки стероидомов.

Ключевые слова

Анализ стероидов

Проблемы

Количественная оценка

Относительная оценка

Стероидом

Рекомендуемые статьиЦитирующие статьи (0)

Ссылки на статьи

JCM | Бесплатный полнотекстовый | Гиперандрогения методом тандемной масс-спектрометрии жидкостной хроматографии при СПКЯ: в центре внимания тестостерон и андростендион

1.Введение

Синдром поликистозных яичников (СПКЯ) — распространенное эндокринологическое заболевание с распространенностью до 9–18% у женщин репродуктивного возраста, связанное с репродуктивными и метаболическими дисфункциями [1,2]. Диагноз основан на ассоциации двух состояний из следующих: олигоановуляция (ОА), микрополикистозная морфология яичников (mPCO) и гиперандрогенизм (Ha) (который может определяться клиническими (гирсутизм, угри или алопеция) или биохимическими ( высокие концентрации андрогенов) результаты) [3,4].Однако оценка клинической гиперандрогении является сложной задачей, поскольку ее количественная оценка опирается на визуальные оценки, которые подвержены вариабельности между наблюдателями [5]. Хотя текущие руководства рекомендуют использовать надежные методы измерения стероидов, это не всегда возможно в клинической практике из-за их недоступности и высокой стоимости. Несмотря на это, иммуноанализы, которым не хватает чувствительности и точности для измерения андрогенов у женщин, остаются наиболее часто используемым методом [6,7].Более того, нет общего согласия относительно того, какой андроген следует измерять, поскольку несколько источников гормонов и ферментативных путей (включая 11-оксигенированный стероидный путь C19) вовлечены в патогенез СПКЯ [8,9]. Текущие руководящие принципы рекомендуют первоначально измерять общий тестостерон (T) и свободный тестостерон (fT), а андростендион (A) добавляется при достижении нормальных концентраций T и fT [4]. Сообщалось, что A представляет собой важный маркер СПКЯ, предоставляющий важную информацию о метаболическом риске.Более того, некоторые авторы утверждают, что мультистероидный профиль может быть более чувствительным при выявлении гиперандрогении у этих пациентов [10,11,12]. Вероятно, что использование жидкостной хроматографии в тандеме с масс-спектрометрией (ЖХ-МС / МС), золотым стандартом для измерения стероидов, позволяющим одновременно измерять несколько андрогенов, может улучшить диагностику и фенотипирование пациентов с СПКЯ [13]. Однако этот метод имел ограниченное применение в клинической практике из-за своей сложности и сложности с подготовкой образцов для контроля качества, которая увеличивалась с увеличением количества аналитов.Недавно коммерческий продукт, специально разработанный для измерения стероидных панелей с помощью ЖХ-МС / МС, стал коммерчески доступным.

Целью нашего исследования было оценить влияние использования LC-MS / MS на диагностику СПКЯ в группе пациентов, направленных в наш центр. Более того, наше исследование определило, какой андроген был наиболее точным для различения между СПКЯ и контрольной группой. Мы также коррелировали концентрации андрогенов и метаболические параметры.

2. Экспериментальная часть

2.1. Субъекты

. Мы обследовали 131 пациентку репродуктивного возраста, направленную в эндокринологическое отделение поликлиники IRCCS Fondazione Ca ’Granda Ospedale Maggiore Policlinico с подозрением на СПКЯ в течение 2 лет. Мы включили субъектов со следующими характеристиками: возраст ≥ 18 лет, клинический гиперандрогенизм (гирсутизм, алопеция или угри) и / или нарушения менструального цикла, отсутствие мешающих препаратов (например, эстропрогестиники, глюкокортикоиды) и не вторичные формы СПКЯ (гиперпролактинемия, не -классическая врожденная гиперплазия надпочечников, гипотиреоз, гиперкортизолизм, акромегалия и др.). Мы исключили семь пациентов, потому что они не выполнили диагностическую схему, и еще семь пациентов, потому что они получили другой диагноз или имели вторичные формы СПКЯ (неклассическая врожденная гиперплазия надпочечников, n = 3; гипогонадотропный гипогонадизм, n = 4). Из 131 пациента, направленного в отделение эндокринологии, 117 были включены в наше исследование.

73 худощавые женщины европеоидной расы репродуктивного возраста (возраст 33,5 ± 3,6 года, ИМТ 20,9 ± 3,6 кг / м ²) с регулярными менструациями, без результатов ультразвукового исследования mPCO и без клинических признаков гиперандрогении служили контролем для получения иммуноанализа ( IA) и референсные интервалы ЖХ-МС / МС для T (0.05–0,45 и 0,11–0,34 нг / мл), fT (0,05–0,57 и 0,11–0,41 нг / дл) и A (0,1–3,0 и 0,4–1,6 нг / мл; соответственно.

Протокол исследования был одобрен местный комитет по этике, и письменное информированное согласие было получено от всех участников.

2.2. Методы

Каждый субъект прошел медицинское обследование и забор крови. Мы записали рост, вес, окружность талии, артериальное давление, ИМТ и Ferryman Gallwey Оценка: Образцы крови получали натощак в фолликулярной фазе у субъектов с регулярными менструациями или легкой олигоменореей, а также после кровотечения, вызванного отменой прогестина, у субъектов с тяжелой олигоменореей или аменореей.Мы измерили лютеинизирующий гормон (ЛГ), фолликулостимулирующий гормон (ФСГ), глюкозу, инсулин, общий холестерин, ЛПВП, триглицериды, альбумин, пол-связывающий глобулин (ГСПГ), Т, А и сульфат дегидроэпиандростерона (ДГЭАС). Глобулин, связывающий половые гормоны (SHBG), измеряли с помощью Immulite 2000 (Siemens Healthineers, Милан, Италия). Мы рассчитали fT по формуле Вермёлена и индекс свободных андрогенов (FAI) по формуле Tx100 / SHBG [14]. Диагноз СПКЯ был подтвержден в соответствии с более поздними рекомендациями [9].Олиго-ановуляция определялась как наличие нерегулярных менструальных циклов (аменорея, олигоменорея: продолжительность цикла> 35 дней или 4). Морфология поликистозных яичников оценивалась с помощью эндовагинального ультразвукового исследования или, если это невозможно, трансабдоминального исследования с использованием частоты датчика ≥8 МГц. Мы определили морфологию поликистозных яичников (mPCO), если количество антральных фолликулов (AFC) было ≥20 или объем яичников ≥10 см ³ [4]. Клинический гиперандрогенизм определялся обнаружением алопеции, угрей или гирсутизма. (оценка mFG> 5), тогда как биохимическая гиперандрогения определялась высокими концентрациями T, fT или A.Вторичные причины ПКЯ (гиперкортизолизм, неклассическая врожденная гиперплазия надпочечников, гиперпролактинемия, акромегалия, андроген-секретирующие опухоли, лекарственные препараты и дисфункция щитовидной железы) были исключены с помощью клинической и биохимической оценки. Зарегистрированные субъекты были изначально классифицированы как не страдающие СПКЯ или СПКЯ на основании уровней T, fT и A, оцененных IA. Затем оценивали влияние ЖХ-МС / МС на диагностику СПКЯ путем измерения уровней T, fT и A с помощью LC-MS / MS.

2.3. Анализы

Все измерения гормонов проводились в одной лаборатории.

Андрогены определялись как с помощью IA (Cobas Elecsys Testosterone II, CV 5,5%, LOQ 0,12 мкг / л; Immulite 2000 Androstenedione CV 10%, LOQ 0,3 мкг / л), так и с помощью стероидов IVD-MS в наборе сыворотки (MassChrom, Steroids в сыворотке / плазме, Chromsystems, Грефельфинг, Германия). После этих тестов был проведен анализ с помощью ЖХ-МС / МС (CV между анализами: 6% A и 5% T; CV внутри анализа: 2% A и 2% T; LOQ A: 0,02 мкг / л и T 0,005. мкг / л). Хроматографическое разделение и масс-спектрометрическое детектирование выполняли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (Agilent, Турин, Италия), сопряженной с масс-спектрометром Sciex 5500 QTRAP (Sciex, Милан, Италия).Образцы были приготовлены в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, 500 мкл каждого образца, калибраторов или контрольной сыворотки (QC) помещали в предварительно уравновешенные планшеты для образцов SPE, в которые добавляли 50 мкл раствора смеси дейтерированного внутреннего стандарта, а также 450 мкл буфера для экстракции. Затем этот смешанный образец встряхивали и центрифугировали. Супернатант выпаривали в атмосфере азота досуха и восстанавливали 100 мкл буфера для восстановления, аликвоту 40 мкл вводили в систему ЖХ, снабженную аналитической колонкой (работающей при 32 ° C) для разделения пиков.Подвижные фазы A и B (поставляемые с набором) использовали для элюирования стероидов. Для количественного определения аналитов использовали матрицу холостого калибратора и шесть многоуровневых калибраторов сыворотки, поставляемые с набором. Три сертифицированных сыворотки QC, поставляемые с набором, были использованы для оценки точности и точности внутри и между запусками. Во время рутинных анализов калибровочные кривые и контроль качества выполнялись для каждого набора неизвестных образцов. Типичная аналитическая последовательность состоит из калибровочной кривой, за которой следуют неизвестные образцы, образцы QC повторяются каждые десять неизвестных образцов, после чего следует вторая калибровочная кривая.

2.4. Статистический анализ

Статистический анализ выполняли с использованием статистического пакета SPSS версии 25.0 (SPSS Inc., Чикаго, Иллинойс, США) и статистического программного обеспечения MedCalc для Windows (Остенде, Бельгия). Сравнение непрерывных переменных проводилось с использованием t-критерия или критерия Манна-Уитни, в зависимости от ситуации. Нормальность распределения проверялась тестом Колмогорова – Смирнова. Переменные выражались как среднее значение ± стандартное отклонение, если распределение нормально, и как медиана (межквартильный размах), если распределение не было нормальным.Сравнения проводились с использованием одностороннего t-критерия Стьюдента или U-критерия Манна – Уитни соответственно. Значение p менее 0,05 считалось значимым. Двумерные связи были проверены с помощью продукта-момента Пирсона (r) или ранговой корреляции Спирмена (rs), в зависимости от ситуации. Точность T, fT, FAI и A при различении пациентов с СПКЯ и контрольной группы оценивалась с использованием площади под кривыми рабочих характеристик приемника (ROC).

3. Результаты

У всех 117 обследованных субъектов концентрации андрогенов, измеренные с помощью ЖХ-МС / МС, имели тенденцию быть ниже, чем с помощью IA, хотя статистически значимые различия наблюдались только для A (0.42 межквартильный размах, IQR 0,22 против 0,38 IQR 0,23 нг / мл, p = 0,221; 0,64 IQR 0,46 против 0,58 IQR 0,42 нг / дл, p = 0,369; 2,5 IQR 1,9 против 1,8 IQR 0,6, p = 0,001; соответственно, для T, fT и A по данным IA и LC-MS / MS). СПКЯ был диагностирован у 90/117 пациентов с помощью обычного IA и у 93/117 пациентов (+ 3,3%) с помощью LC-MS / MS.

Что касается диагностики с помощью ЖХ-МС / МС, мы сравнили клинические, метаболические и биохимические параметры у субъектов без СПКЯ и СПКЯ (Таблица 1). Мы обнаружили, что пациенты с СПКЯ имели значительно более высокий объем яичников, концентрации NFPO и ЛГ и чаще имели олигоменореи, чем пациенты без СПКЯ.Хотя ИМТ и талия были сопоставимы между двумя группами, концентрации инсулина и HOMA-индекс были значительно выше у пациентов с СПКЯ, а концентрации ЛПВП и ГСПГ были ниже. Концентрации T, fT и A имели тенденцию быть выше у пациентов с СПКЯ как по данным LC-MS / MS, так и IA; однако мы обнаружили статистически значимые различия только в FAI обоими методами. Мы разделили пациентов с СПКЯ на фенотипы Роттердама в соответствии с различными комбинациями олигоаменореи (ОА), клинической и / или биохимической гиперандрогении (Ha) и поликистозных яичников (mPCO).Распространенность различных фенотипов у пациентов с СПКЯ составила n = 40 (43,2%) полного (OA + mPCO + Ha) фенотипа, n = 39 (42%) классического (OA + Ha) фенотипа, n = 13 (13,7%) овуляторных (Ha + mPCO) фенотип и n = 1 (1,1%) нормоандрогенный (OA + mPCO) фенотип. Сравнение фенотипов Роттердамского СПКЯ показало, что распространенность субъектов с высоким уровнем андростендиона, измеренная с помощью ЖХ-МС / МС (hA-TM), была значительно выше в классическом фенотипе по сравнению с обоими полными (77,1 против 55,6%, p = 0,050) и группы овуляторного фенотипа (77.1 против 45,5%, p = 0,046). Более того, они не различались по клиническим, метаболическим и биохимическим параметрам или концентрациям других стероидов (данные не показаны). Биохимический гиперандрогенизм (высокий T и / или fT и / или A по данным ЖХ-МС / МС) присутствовал у 83 (89,2 %) Пациенты с СПКЯ. Распределение различных паттернов биохимического гиперандрогении у пациентов с СПКЯ показано на рисунке 1. Результаты показали, что fT был наиболее часто повышенным андрогеном (68/93, 73,1%), за которым следует A (60/93, 64,5%). Более того, 40.У 8% (38/93) пациентов одновременно наблюдались высокие уровни T, fT и A. Анализ ROC показал высокую и сопоставимую точность для A (пороговое значение 1,16 нг / мл, Sn 91% Sp 88%) и fT ( отсечка 0,34 нг / дл, Sn 91% Sp 89%) при дифференциации пациентов с СПКЯ от контроля, в то время как FAI (отсечка 1,67, Sn 90% Sp 83%) и T (отсечка 0,24 нг / мл, Sn 87% Sp 75 %) имели худшую точность (рисунок 2).

У пациентов с СПКЯ ни А, ни Т, измеренные с помощью ЖХ-МС / МС, не коррелировали с какими-либо клиническими или метаболическими параметрами. Однако мы обнаружили значительную корреляцию между концентрациями fT ЖХ-МС / МС и ИМТ (r = 0.346, p = 0,002), HOMA-index (0,250, p = 0,042), HbA1c (r = 0,337, p = 0,025) и SHGB (r = -0,353, p = 0,002). Кроме того, FAI, рассчитанный на основе данных ЖХ-МС / МС, достоверно коррелировал с ИМТ (r = 0,398, p = 0,001), индексом HOMA (r = 0,289, p = 0,016), талией (r = 0,408, p = 0,001). ) и ГСПГ (r = −0,353, p = 0,002). Более того, SHBG был биохимическим маркером, который лучше всего коррелировал со следующими метаболическими параметрами: ИМТ (r = -0,531, p = 0,001), талия (r = -0,502, p = 0,001), HOMA-индекс (r = -0.468, p = 0,001), HbA1c (r = -0,300, p = 0,046) и тяжесть гирсутизма (r = -0,404, p = 0,001).

4. Обсуждение

В нашей когорте использование метода ЖХ-МС / МС привело к незначительному увеличению количества диагнозов СПКЯ (+ 3,3%) по сравнению с IA. Пациенты с СПКЯ демонстрировали более высокий индекс HOMA и более низкие уровни ХС-ЛПВП и ГСПГ, чем пациенты без СПКЯ. Биохимический гиперандрогенизм (высокий T и / или fT и / или A по данным ЖХ-МС / МС) был идентифицирован почти в 90% случаев СПКЯ. Концентрации свободного тестостерона коррелировали с метаболически неблагоприятными параметрами, и он был наиболее часто повышенным андрогеном в нашей когорте, за которым следовали A.Анализ кривой ROC показал, что концентрации fT и A были лучшими для различения пациентов с СПКЯ и контрольной группы.

Выявление гиперандрогении является краеугольным камнем при оценке СПКЯ. Однако его определение всегда вызывало беспокойство из-за низкой точности, показываемой рутинными анализами андрогенов, и разногласий относительно того, какой андроген следует оценивать. Согласно действующим руководящим принципам, андрогены следует предпочтительно измерять с помощью высокоточных методов, таких как ЖХ-МС / МС.Метод LC-MS / MS позволяет одновременно измерять несколько стероидов, что обеспечивает быстрое время анализа и улучшает специфичность по сравнению с IA. Однако из-за того, что он труднодоступен, его применение в повседневной клинической практике не получило широкого распространения. Более того, интерпретация результатов осложнялась сложностью и трудностью приготовления калибраторов и образцов для контроля качества, а также отсутствием однозначных пороговых значений. Некоторые лаборатории в настоящее время используют коммерчески доступные наборы, специально разработанные для измерения стероидных панелей в анализах ЖХ-МС / МС.Стандартные референсные интервалы могут быть разработаны на основе общих данных, что даст главное преимущество согласования интерпретации результатов в разных центрах. Было высказано предположение, что применение ЖХ-МС / МС может улучшить оценку гиперандрогении и диагностику СПКЯ. Однако недавний метаанализ по этому вопросу показал, что все еще недостаточно исследований, чтобы сделать окончательные выводы [15]. В соответствии с другими авторами, которые сообщили о минимальном улучшении диагностики СПКЯ в нашей когорте, использование коммерчески доступного набора ЖХ-МС / МС для измерения Т и А привело к небольшому увеличению (+3.3%) по количеству выявленных пациентов с СПКЯ по сравнению с ИА [16]. Вероятно, что измерение 11-оксигенированных андрогенов (11β-гидроксиандростендиона, 11-кетотестостерона и 11-кето-5α-дигидротестостерона) с помощью ЖХ-МС / МС может привести к выявлению более высокой доли пациентов с СПКЯ, хотя, Насколько нам известно, в настоящее время нет коммерчески доступных внутренних стандартов, которые могли бы ограничить их использование в клинических условиях [8]. Мы подтвердили предыдущие сообщения о том, что более низкие концентрации гормонов обычно обнаруживаются при использовании ЖХ-МС / МС по сравнению с ИА. [17,18].Мы также получили из контрольной группы (n = 73) половые и возрастные контрольные диапазоны для A (0,4–1,6 нг / мл) и T (0,11–0,34 нг / мл). Кроме того, мы рассчитали fT (0,11–0,41 нг / дл) с помощью набора MassChrome LC-MS / MS, о котором, насколько нам известно, ранее не сообщалось в литературе. Наши результаты аналогичны другим исследованиям, в которых использовались другие наборы [19]. При измерении Т и / или А с помощью ЖХ-МС / МС и / или fT, рассчитанных по формуле Вермёлена, мы обнаружили, что у 89 пациентов присутствует биохимический гиперандрогенизм.1% больных СПКЯ. Аналогичные результаты были получены другими авторами на основе A в сочетании с T или FAI [7,10,11]. У наших пациентов fT был наиболее часто повышенным андрогеном, за ним следовал A, и 40,8% пациентов имели сопутствующие высокие уровни T, fT и A, подтверждающие предыдущие выводы [6,10,11]. Анализ кривой ROC показал, что с помощью анализа LC-MS / MS андроген A может различать пациентов с СПКЯ и контрольную группу аналогично fT и более точно, чем T или FAI. О тех же результатах сообщили Pasquali et al.[10]. Наши данные подтверждают предположение о том, что профилирование стероидов, которое включает андроген А, полезно для правильной идентификации пациентов с гиперандрогенным СПКЯ, и что А является столь же точным, как fT, для дифференциации пациентов с СПКЯ и контрольной группы. Это важный вывод, поскольку определение fT или его пороговое значение не всегда доступны. В нашем исследовании мы обнаружили, что концентрации fT коррелировали с метаболически неблагоприятными параметрами (ИМТ, HOMA-индекс и HbA1c), тогда как корреляции между A не было. и метаболические аспекты.Это контрастирует с выводами O’Reilly et al. которые описывают значительную связь между высокими концентрациями A и неблагоприятным метаболическим фенотипом, но подтверждают результаты метанализов Amiri et al. [11,12,13,14,15].

У нашего исследования были некоторые ограничения, которые могли повлиять на наблюдаемые результаты. Во-первых, наша популяция СПКЯ была уникальной, вероятно, из-за новых ультразвуковых критериев для определения mPCO; следовательно, было обнаружено очень мало субъектов с фенотипом Роттердамского OA + mPCO.Во-вторых, в целом наши пациенты были более поджарыми и с более благоприятным метаболическим профилем.

Наши результаты согласуются с предыдущими исследованиями, хотя другие исследования могут оценить долю «ложноположительных результатов» с помощью иммуноанализов по сравнению с LC-MS / MS. Однако ни одно исследование не могло оценить количество «ложноотрицательных результатов» в когорте пациентов с подозрением на СПКЯ. Кроме того, большинство статей по этой теме были опубликованы до выпуска самых последних руководств по лечению СПКЯ. Мы использовали эти текущие рекомендации для диагностики СПКЯ в нашем исследовании, что привело к более точному скринингу нашей когорты пациентов [9].Мы также получили референсные интервалы ЖХ-МС / МС из большей контрольной группы, чем в других исследованиях [11,12,13,14,15,16]. Кроме того, мы использовали коммерчески доступный мультистероидный набор LC-MS / MS для измерения андрогенов и получили концентрации, сопоставимые с предыдущими исследованиями, в которых использовались домашние наборы. Этот результат подтверждает воспроизводимость более продвинутых методов, которые позволяют одновременно измерять несколько андрогенов в одном образце [6,7,8].

В заключение, мы представили доказательства того, что при диагностике СПКЯ количественное определение андрогенов на основе метода ЖХ-МС / МС немного более чувствительно, чем на основе анализов IA.Измерение А с помощью ЖХ-МС / МС должно проводиться в обычном порядке у пациентов с подозрением на СПКЯ, особенно если ФТ недоступна, поскольку он может отличить от контрольной группы более точно, чем Т. А также полезен для правильной идентификации субъектов с гиперандрогенным СПКЯ, хотя его роль в оценке метаболического риска остается неясной.

JCI Insight — Добро пожаловать

Абстрактные

Недавние генетические исследования и мультистероидные профили послужили основой для подклассификации альдостерон-продуцирующих аденом (APA).Целью настоящего исследования было создание комплексной карты масс-спектрометрии с высоким разрешением (MSI) APA в зависимости от морфометрии, иммуногистохимических профилей, мутационного статуса и клинического исхода. В когорту исследования вошли 136 пациентов с односторонним первичным альдостеронизмом. Был проведен MSI с матричной лазерной десорбцией / ионизацией-преобразованием Фурье-ионным циклотронным резонансом, а профили метаболитов были проанализированы с использованием информации о генотипе / фенотипе, включая анализ цифровых изображений на основе морфометрии и ИГХ стероидогенных ферментов.Наблюдались отчетливые молекулярные сигнатуры между KCNJ5- и CACNA1D-мутантными APA со значительными различиями в 137 метаболитов, включая метаболиты пуринового метаболизма и стероидогенеза. Внутриопухолевые концентрации 18-оксокортизола и 18-гидроксикортизола обратно коррелировали с интенсивностью окрашивания CYP11B1. Более низкая интенсивность окрашивания CYP11B1 и более высокие уровни 18-оксокортизола были связаны с более высокой вероятностью полного клинического успеха после операции. Настоящее исследование демонстрирует различные метаболомные профили APA в зависимости от генотипа опухоли.Кроме того, мы выявили обратную корреляцию между производными кортизола и CYP11B1 и влиянием 18-оксокортизола и CYP11B1 на клинический исход, что дает беспрецедентное понимание патофизиологии, клинических особенностей и стероидогенеза APA.

Авторы

Масанори Мураками, Яра Райем, Томас Кунцке, На Сан, Аннетт Фейхтингер, Филипп Людвиг, Тим Маттиас Стром, Селсо Гомес-Санчес, Томас Кнёзель, Томас Кирхнер, Трейси Энн Уильямс, Мартин Райнке, Аксель Карл Вальч, Феликс Бушлей

Загрузите эту цитату для этих менеджеров цитирования:

Или загрузите эту цитату в следующих форматах:

Если у вас возникнут проблемы с использованием этих форматов цитирования, отправьте нам отзыв.